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目的:通过稳定、高效、低毒的基因转染方法将nm23-H1基因导入该基因缺失的人肺大细胞癌株L9981,从基因及蛋白水平鉴定nm23-H1基因转染肺癌细胞的建立.方法:以JM109为宿主菌,转化质粒载体PCMV-neo-Bam-nm23-H1,制备nm23-H1基因的真核表达载体;利用阳离子脂质体Lipofectamine介导,将nm23-H1基因导入L9981细胞株.采用RT-PCR技术检测转染后nm23-H1基因的表达,并用Western blot技术检测转染后nm23-H1蛋白的表达.结果:转染后的L9981细胞株中可检测到rim23-H1 mRNA及nm23-H1蛋白的阳性表达.结论:建立表达nm23-H1基因的肺癌细胞株L9981,为研究nm23-H1对肺癌恶性转移表型的逆转作用作基础准备.

作者:郑海霞;周清华;申东兰;彭安;何艳玲;曹菊秀

来源:癌变·畸变·突变 2011 年 23卷 2期

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作者:
郑海霞;周清华;申东兰;彭安;何艳玲;曹菊秀
来源:
癌变·畸变·突变 2011 年 23卷 2期
标签:
nm23-H1 基因转染 肺癌细胞 肿瘤转移
目的:通过稳定、高效、低毒的基因转染方法将nm23-H1基因导入该基因缺失的人肺大细胞癌株L9981,从基因及蛋白水平鉴定nm23-H1基因转染肺癌细胞的建立.方法:以JM109为宿主菌,转化质粒载体PCMV-neo-Bam-nm23-H1,制备nm23-H1基因的真核表达载体;利用阳离子脂质体Lipofectamine介导,将nm23-H1基因导入L9981细胞株.采用RT-PCR技术检测转染后nm23-H1基因的表达,并用Western blot技术检测转染后nm23-H1蛋白的表达.结果:转染后的L9981细胞株中可检测到rim23-H1 mRNA及nm23-H1蛋白的阳性表达.结论:建立表达nm23-H1基因的肺癌细胞株L9981,为研究nm23-H1对肺癌恶性转移表型的逆转作用作基础准备.