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目的:研究婆罗双树样基因2(sal-like gene 2,SALL2)干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计针对SALL2基因的3条小干扰RNA(siRNA-1、2、3),并设载体组及未转染对照组,使用脂质体转染HeLa细胞.采用逆转录RT-PCR和Westernblot检测转染后HeLa细胞中SALL2 mRNA和蛋白的表达以筛选沉默效果最好的siRNA片段.将最适siRNA片段转染HeLa细胞后,采用CCK-8检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率.结果:对照组HeLa细胞高表达SALL2.载体组和转染siRNA-3组SALL2的mRNA和蛋白表达与对照组相比,差异均无统计学意义(P均>0.05),而siRNA-1和siRNA-2转染48 h后,HeLa细胞SALL2的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05),其中siRNA-1的沉默效率更好,故后续选择siRNA-1作为干扰组.与对照组相比,转染siRNA-1 48和72 h后细胞的增殖率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);转染48 h后siRNA-1组处于G0/G1期的细胞比例减少,凋亡率明显降低(P均<0.05).结论:SALL2基因干扰可明显提高HeLa细胞的增殖率,并降低其凋亡率.提示SALL2基因对宫颈癌HeLa细胞的增殖有抑制作用.

作者:张雪杉;缪芳;曹晏宁;张晓姝

来源:癌变·畸变·突变 2016 年 28卷 5期

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作者:
张雪杉;缪芳;曹晏宁;张晓姝
来源:
癌变·畸变·突变 2016 年 28卷 5期
标签:
宫颈癌 SALL2基因 细胞增殖 细胞周期 凋亡 cervical carcinoma SALL2 gene cell proliferation cell cycle apoptosis
目的:研究婆罗双树样基因2(sal-like gene 2,SALL2)干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计针对SALL2基因的3条小干扰RNA(siRNA-1、2、3),并设载体组及未转染对照组,使用脂质体转染HeLa细胞.采用逆转录RT-PCR和Westernblot检测转染后HeLa细胞中SALL2 mRNA和蛋白的表达以筛选沉默效果最好的siRNA片段.将最适siRNA片段转染HeLa细胞后,采用CCK-8检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率.结果:对照组HeLa细胞高表达SALL2.载体组和转染siRNA-3组SALL2的mRNA和蛋白表达与对照组相比,差异均无统计学意义(P均>0.05),而siRNA-1和siRNA-2转染48 h后,HeLa细胞SALL2的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05),其中siRNA-1的沉默效率更好,故后续选择siRNA-1作为干扰组.与对照组相比,转染siRNA-1 48和72 h后细胞的增殖率均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);转染48 h后siRNA-1组处于G0/G1期的细胞比例减少,凋亡率明显降低(P均<0.05).结论:SALL2基因干扰可明显提高HeLa细胞的增殖率,并降低其凋亡率.提示SALL2基因对宫颈癌HeLa细胞的增殖有抑制作用.