目的:研究蛋白激酶C(PKC)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)在溶血磷脂酸(LPA)诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达中的作用.方法:培养HLF-1细胞,以不同浓度(0、1、3和10 μmol/L)的LPA处理细胞不同时间(0.5、6、12和24h)后,ELISA检测细胞培养基上清液中MCP-1的蛋白表达,荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA的表达水平.用不同浓度的PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I(0、0.1、l和10 μmol/L)或JNK抑制剂SP600125(0、0.1、1和10 μmol/L)预孵育细胞30 main后,用LPA(10 μmol/L)刺激2或6h后,ELISA方法检测细胞培养基上清液中MCP-1的蛋白表达,荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达水平.用PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I(1 μmol/L)预孵育30 min,以浓度为10 μmol/L的LPA处理细胞不同时间(0、5、30和60 min)后,Western blot检测c-Jun蛋白磷酸化水平.结果:LPA可诱导HLF-1细胞MCP-1蛋白释放,并呈剂量效应和时间效应关系.LPA的浓度为10μ.tmol/L时,HLF-1细胞释放MCP-1蛋白的量是对照组的2.4倍(P<0.05);细胞在LPA处理24h后,MCP-1蛋白的释放量较对照组增加约1倍(P<0.05).LPA可诱导HLF-1细胞MCP-1 mRNA的表达并呈时间效应,LPA处理2h后,MCP-1 mRNA表达水平是对照组的5.3倍(P<0.05).PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和
作者:尹齐;许铭炎;傅玉才;邓小玲
来源:癌变·畸变·突变 2017 年 29卷 1期