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目的:采用 shRNA 沉默 Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体 Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和 Western blot 法验证沉默效果。采用细胞增殖实验、集落形成实验、细胞周期和细胞衰老等实验观察沉默 Piwil2表达对宫颈癌细胞生物学特性的影响。结果建立稳定转染 Sh-piwil2宫颈癌细胞株,与对照组相比,沉默Piwil2表达后细胞的增殖和集落形成能力均显著降低(P <0.05);细胞 G0/ G1期比例增加、S 期比例明显下降( P <0.05),同时沉默 Piwil2后细胞衰老数量明显增多( P <0.05)。结论沉默 Piwil2基因可发挥抗宫颈癌作用,推测Piwil2基因可作为宫颈癌临床治疗的一个潜在靶点。

作者:张红丽;冯定庆;凌斌;尤青叶;李兵;伍娇娇;赵婷婷

来源:安徽医科大学学报 2015 年 5期

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作者:
张红丽;冯定庆;凌斌;尤青叶;李兵;伍娇娇;赵婷婷
来源:
安徽医科大学学报 2015 年 5期
标签:
宫颈癌 shRNA Piwil2 细胞增殖 细胞衰老 cervical cancer shRNA Piwil2 cell proliferation cell senescence
目的:采用 shRNA 沉默 Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体 Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和 Western blot 法验证沉默效果。采用细胞增殖实验、集落形成实验、细胞周期和细胞衰老等实验观察沉默 Piwil2表达对宫颈癌细胞生物学特性的影响。结果建立稳定转染 Sh-piwil2宫颈癌细胞株,与对照组相比,沉默Piwil2表达后细胞的增殖和集落形成能力均显著降低(P <0.05);细胞 G0/ G1期比例增加、S 期比例明显下降( P <0.05),同时沉默 Piwil2后细胞衰老数量明显增多( P <0.05)。结论沉默 Piwil2基因可发挥抗宫颈癌作用,推测Piwil2基因可作为宫颈癌临床治疗的一个潜在靶点。