利用 PCR 技术扩增目的基因 FGF13VY 亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体pShuttle-CMV中,进而转化至含有AdEasy质粒的大肠杆菌中,进行重组.将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293 细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,qPCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高. FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础.
作者：董梅；陈宇峰；孙如梦；华乐；杨甫；孟丹琳；杨晶；王川
来源：安徽医科大学学报 2018 年 53卷 12期
