目的构建一种带有绿色荧光蛋白(GFP)和潮霉素磷酸转移酶和HSV-TK的融合基因(HyTK基因)的新型腺病毒载体,用于简便、快速地了解自杀基因在恶性肿瘤中的转染效率和提高疗效.方法 利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES),将GFP的cDNA与HyTK真核表达载体重组,构建获得含GFP和HyTK基因真核表达载体,在Lipofectin介导下转染COS-7细胞,检测其表达后进一步克隆获得含GFP和HyTK基因双顺反子腺病毒载体.结果 构建含绿色荧光蛋白和HyTK基因双顺反子腺病毒载体,显示该载体可获得HyTK基因及GFP的良好表达. 结论 含绿色荧光蛋白和HyTK基因双顺反子腺病毒载体的构建为HyTK基因治疗恶性肿瘤用于临床提供了新的治疗工具及随访检测手段.
作者：叶传忠；陈仕平；裴雪涛；杜楠；李梁；冯凯
来源：福建医科大学学报 1999 年 1期
