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目的 观察miRNA-145过表达对卵巢癌顺铂化疗敏感性的增强作用,并探讨其作用机制.方法 取人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP培养至对数生长期,分为Blank组、Mock组、NC组和转染组4组,均给予75 μmol/L的顺铂,Mock组加入转染试剂Lipofectamine 2000,NC组加入无关干扰序列,转染组转染miRNA-145-5p mimics,Blank组加入等量生理盐水,共培养48 h.观察培养24、48 h时各组细胞miRNA-145转染情况;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞培养48 h时miRNA-145、多药耐药基因1(MDR1)mRNA表达水平;采用四唑盐比色法检测细胞培养24、48 h时增殖活性;利用蛋白质印迹法检测培养24、48 h时糖蛋白(P-gp)的表达.结果 培养48 h时,NC组、Blank组、Mock组细胞miRNA-145表达水平均低于转染组,而MDR1 mRNA表达水平均高于转染组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时各组细胞增殖活性均高于培养24 h时,且同一时刻转染组增殖活性均低于NC组、Blank组、Mock组细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时各组细胞凋亡率均明显高于培养24 h时,且各时间NC组、Blank组、Mock组细胞凋亡率均低于转染组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时,NC组、Blank组、Mock组细胞P-gp蛋白相对表达量均高于转染组,差异均有统计学意义(P

作者:丁照黎;谷见法;张飞翔

来源:癌症进展 2020 年 18卷 9期

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作者:
丁照黎;谷见法;张飞翔
来源:
癌症进展 2020 年 18卷 9期
标签:
miRNA-145 卵巢癌 顺铂 化疗敏感性
目的 观察miRNA-145过表达对卵巢癌顺铂化疗敏感性的增强作用,并探讨其作用机制.方法 取人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP培养至对数生长期,分为Blank组、Mock组、NC组和转染组4组,均给予75 μmol/L的顺铂,Mock组加入转染试剂Lipofectamine 2000,NC组加入无关干扰序列,转染组转染miRNA-145-5p mimics,Blank组加入等量生理盐水,共培养48 h.观察培养24、48 h时各组细胞miRNA-145转染情况;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞培养48 h时miRNA-145、多药耐药基因1(MDR1)mRNA表达水平;采用四唑盐比色法检测细胞培养24、48 h时增殖活性;利用蛋白质印迹法检测培养24、48 h时糖蛋白(P-gp)的表达.结果 培养48 h时,NC组、Blank组、Mock组细胞miRNA-145表达水平均低于转染组,而MDR1 mRNA表达水平均高于转染组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时各组细胞增殖活性均高于培养24 h时,且同一时刻转染组增殖活性均低于NC组、Blank组、Mock组细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时各组细胞凋亡率均明显高于培养24 h时,且各时间NC组、Blank组、Mock组细胞凋亡率均低于转染组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).培养48 h时,NC组、Blank组、Mock组细胞P-gp蛋白相对表达量均高于转染组,差异均有统计学意义(P