目的：研究舒尼替尼引起的肾癌细胞出现细胞自噬的机制。方法：以肾癌细胞系 ACHN 细胞为细胞模型，利用3-（4，5-二甲基）-5-（3-羧甲基苯环）-2-（4-硫基苯）-2H-四唑盐复合物[3-（4，5-dimethylthiazol-2-yl）-5-（3-car-boxymethoxyphenyl）-2-（4-sulfophenyl）-2H-tetrazolium，innersalt，MTS]检测法观察舒尼替尼对 ACHN 细胞活性的影响；应用 RNA 干扰技术敲降自噬相关蛋白 Beclin1和微管相关蛋白1轻链3融合蛋白（microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein，LC3）检测自噬与舒尼替尼引起的细胞凋亡。使用电子显微镜和荧光显微镜观察在舒尼替尼作用下自噬体的形成；蛋白质免疫印迹检测舒尼替尼对 LC3-Ⅱ的积累，自噬相关信号通路蛋白激酶 B（pro-tein kinase B，PKB／Akt）、哺乳动物雷帕霉素受体（mammalian target of rapamycin，mTOR）及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase，PARP）切割的变化和过量表达，以及敲降 Akt 检测诱导自噬的变化。结果：舒尼替尼能显著抑制 ACHN 的细胞活性，这种作用具有时间和浓度依赖性；敲降自噬相关蛋白 Beclin1和 LC3减少自噬可改变舒尼替尼引起 PARP 的切割；透射和荧光显微镜观察结果表明，舒尼替尼引起细胞自噬体明

作者：曹珮；姜学军；席志军

来源：北京大学学报（医学版） 2016 年 48卷 4期