目的:探讨Toll样受体(Toll like receptors, TLR)对人牙周膜干细胞成骨分化的影响及其可能的分子机制.方法:应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction, real-time PCR)及流式细胞术检测TLR在人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)上的表达.在成骨培养基中加入多种浓度的不同TLR配体培养7 ～ 14 d,检测TLR对hPDLSCs成骨的影响.通过Western blotting方法检测TLR配体刺激hPDLSCs 7 d 后,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)及蛋白激酶 B(protein kinase B, PKB or AKT)磷酸化水平的变化及runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2, Runx2)的变化,并对比加入MAPK及AKT抑制剂后Runx2的变化,探究TLR是否通过影响下游的MAPK及AKT的活化而影响hPDLSCs的成骨分化.结果:TLR1、TLR3、TLR4、TLR6在hPDLSCs上表达较高,不同TLR的阳性细胞百分比为TLR1 2.82％ ± 0.68％,TLR2 1.26％ ±0.09％,TLR3 13.23％ ±2.05％ ,TLR4 3.64％ ±0. 79％ ,TLR6 3. 21％ ±1.64％,其趋势与 TLR 在 hPDLSCs 中 mRNA 表达相一致.高浓度的 TLR 配体(PolyI:C 10 mg/L, LPS 10 mg/L , Pam3CSK4 1 mg/L, FSL-1 50 μg/L)刺激hPDLSCs可减少矿化

作者：朱云艳；李倩；张怡美；周彦恒

来源：北京大学学报（医学版） 2018 年 50卷 1期