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目的 探讨四物汤通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)途径影响小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)的增殖效应及其分子机制.方法 将40只SD雌性大鼠随机分为5组:正常组,雌二醇组,四物汤高、中、低剂量组,每组8只.以雌二醇药物血清为阳性对照,用高、中、低剂量四物汤药物血清干预MC3 T3-E1细胞,以MTT细胞增殖实验检测各药物血清干预24 h对MC3T3-E1细胞增殖的影响;Western blot及免疫荧光技术检测高剂量四物汤对MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1蛋白表达情况的影响;并应用GPER激动剂G1、拮抗剂G15,EGFR抑制剂AG1478,PI3 K抑制剂LY294002进一步检测高剂量四物汤影响MC3 T3-E1细胞增殖的作用途径和分子机制.结果 与正常血清组比较,高、中、低剂量四物汤药物血清均能促进MC3T3-E1细胞的增殖(P<0.01),加入G1可使高剂量四物汤促增殖作用提高(P<0.01),而加入G15、AG1478、LY294002使高剂量四物汤的促增殖作用减弱(P<0.01).Western blot和免疫荧光结果均显示,四物汤药物血清增加MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1的蛋白表达,与正常血清组比较差异有统计学意义(P<0.01),G1同时干预时上述蛋白表达量较高剂量四物汤增加(P<0.01),分别加入G15、AG1478

作者:崔丽霞;石丹宁;焦世红;赵丕文;孙丽萍;牛建昭

来源:北京中医药大学学报 2019 年 42卷 11期

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崔丽霞;石丹宁;焦世红;赵丕文;孙丽萍;牛建昭
来源:
北京中医药大学学报 2019 年 42卷 11期
标签:
四物汤 MC3T3-E1细胞 雌激素样 G蛋白偶联雌激素受体 表皮生长因子受体
目的 探讨四物汤通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)途径影响小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)的增殖效应及其分子机制.方法 将40只SD雌性大鼠随机分为5组:正常组,雌二醇组,四物汤高、中、低剂量组,每组8只.以雌二醇药物血清为阳性对照,用高、中、低剂量四物汤药物血清干预MC3 T3-E1细胞,以MTT细胞增殖实验检测各药物血清干预24 h对MC3T3-E1细胞增殖的影响;Western blot及免疫荧光技术检测高剂量四物汤对MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1蛋白表达情况的影响;并应用GPER激动剂G1、拮抗剂G15,EGFR抑制剂AG1478,PI3 K抑制剂LY294002进一步检测高剂量四物汤影响MC3 T3-E1细胞增殖的作用途径和分子机制.结果 与正常血清组比较,高、中、低剂量四物汤药物血清均能促进MC3T3-E1细胞的增殖(P<0.01),加入G1可使高剂量四物汤促增殖作用提高(P<0.01),而加入G15、AG1478、LY294002使高剂量四物汤的促增殖作用减弱(P<0.01).Western blot和免疫荧光结果均显示,四物汤药物血清增加MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1的蛋白表达,与正常血清组比较差异有统计学意义(P<0.01),G1同时干预时上述蛋白表达量较高剂量四物汤增加(P<0.01),分别加入G15、AG1478