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目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)与人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)基因真核表达载体,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础.方法:将pcDNA3.1-IGF-1质粒和pcDNA3-GFP质粒扩增后,经限制性酶切下pcDNA3-GFP中的含有CMV启动子的全长GFP cDNA片段,连接到pcDNA3.1-IGF-1内,构建含有两个多克隆位点的pcGI真核基因共表达载体.结果:酶切及琼脂糖电泳分析表明提取及纯化的pcGI质粒含有GFP cDNA和hIGF-1 cDNA碱基片段,方向及大小正确.结论:成功构建了含有GFP和hIGF-1基因的真核表达载体.

作者:张绍昆;高萍;张琪;刘一;徐莘香

来源:吉林大学学报(医学版) 2005 年 31卷 1期

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作者:
张绍昆;高萍;张琪;刘一;徐莘香
来源:
吉林大学学报(医学版) 2005 年 31卷 1期
标签:
绿色荧光蛋白 胰岛素样生长因子-I 真核表达载体 基因疗法 软骨疾病/治疗
目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)与人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)基因真核表达载体,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础.方法:将pcDNA3.1-IGF-1质粒和pcDNA3-GFP质粒扩增后,经限制性酶切下pcDNA3-GFP中的含有CMV启动子的全长GFP cDNA片段,连接到pcDNA3.1-IGF-1内,构建含有两个多克隆位点的pcGI真核基因共表达载体.结果:酶切及琼脂糖电泳分析表明提取及纯化的pcGI质粒含有GFP cDNA和hIGF-1 cDNA碱基片段,方向及大小正确.结论:成功构建了含有GFP和hIGF-1基因的真核表达载体.