目的:克隆大鼠促凋亡基因Smac,构建真核表达载体pcDNA3.1+-rSmac,并在心肌细胞中表达.方法:应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从大鼠肾组织中扩增到大鼠Smac基因的CDs片段,构建含Smac基因的真核表达载体pcDNA3.1+-rSmac,并将此重组质粒、空载体pcDNA3.1+、pcDNA3.1+-EGFP通过脂质体介导转染大鼠心肌细胞H9C2,荧光显微镜、流式细胞术间接检测转染效率,RT-PCR法检测外源基因的表达.结果:经测序目的基因序列与GenBank(NM_001008292)公布的结果一致,所构建的重组质粒DcDNA3.1+-rSmac经PCR和酶切鉴定所释放的片段大小与预期结果相符.荧光显微镜和流式细胞术检测,细胞转染有效,转染效率达38.36
作者：郭彩霞；李艳博；王华；冯星；黄渭；孙志伟
来源：吉林大学学报（医学版） 2008 年 34卷 3期
