目的:构建含有人TLT-2基因的真核表达载体,并通过转染获得稳定表达TLT-2分子的L929转基因细胞株.方法 运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从健康人外周血单个核细胞(PBMC)的cDNA文库获得全长TLT-2基因,经过双酶切(XhoⅠ和EcoRⅠ)装入逆转录病毒表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染L929细胞,经G418抗性筛选,流式细胞术、RT-PCR及Western blot鉴定TLT-2分子的表达.结果构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/hTLT-2,建立了稳定转染TLT-2目的:基因的L929细胞株.结论 成功构建了TLT-2真核表达载体并获得了稳定转染该分子的转基因细胞,为进一步研究人TLT-2分子的生物学功能提供了物质基础.
作者：周斌；傅丰庆；徐俊驰；沈宇；高菲；张学光
来源：苏州大学学报（医学版） 2011 年 31卷 3期
