目的:探讨人Tip30全长基因的真核表达载体pAAV-TIP30的构建,并观察其转染肝癌细胞株HepG2后的表达.方法:以正常人肝组织mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增Tip30,利用限制性内切酶BamH I和Xba Ⅰ,将Tip30基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中,并经酶切和测序鉴定.重组质粒转染HepG2细胞,运用Western blot法检测Tip30蛋白表达.结果:RT-PCR方法正确地扩增出全长Tip30基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实Tip30基因克隆完全正确.重组质粒转染肝癌细胞系HepG2后,Western blot证实Tip30蛋白表达增高.结论:成功构建了真核表达重组质粒pAAV-TIP30并转染HepG2细胞,为进一步研究Tip30基因对肝癌的影响及其机制打下了基础.
作者：李浩；吴金术；龚连生；潘一峰；王渊璟；刘勤；王宪伟
来源：中国普通外科杂志 2012 年 21卷 1期
