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目的将血管抑素基因转染入人肝癌细胞SMMC-7721中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响,并探讨血管抑素治疗动物种植性肿瘤的效果. 方法将鼠源性血管抑素基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒,用HindⅢ和XbaⅠ双酶切及基因测序进行鉴定. 然后用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-mAST转染入人肝癌细胞SMMC-7721中,并行RT-PCR鉴定和Western-blot检测其表达效果. 结果鼠血管抑素基因成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中;经脂质体法转染入SMMC-7721细胞并获稳定表达;转染血管抑素和未转染血管抑素的SMMC-7721细胞生长速度无明显差异. 结论鼠血管抑素基因在人肝癌细胞SMMC-7721中可获稳定表达,但对细胞本身生长无明显抑制作用.

作者:陶开山;吴兴安;窦科峰

来源:第四军医大学学报 2001 年 22卷 17期

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陶开山;吴兴安;窦科峰
来源:
第四军医大学学报 2001 年 22卷 17期
标签:
血管抑素 真核表达 载体 转染
目的将血管抑素基因转染入人肝癌细胞SMMC-7721中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响,并探讨血管抑素治疗动物种植性肿瘤的效果. 方法将鼠源性血管抑素基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒,用HindⅢ和XbaⅠ双酶切及基因测序进行鉴定. 然后用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-mAST转染入人肝癌细胞SMMC-7721中,并行RT-PCR鉴定和Western-blot检测其表达效果. 结果鼠血管抑素基因成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中;经脂质体法转染入SMMC-7721细胞并获稳定表达;转染血管抑素和未转染血管抑素的SMMC-7721细胞生长速度无明显差异. 结论鼠血管抑素基因在人肝癌细胞SMMC-7721中可获稳定表达,但对细胞本身生长无明显抑制作用.