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已有实验表明,细胞转染效率可能决定于DNA-脂质体复合物的形成以及所转染的细胞种类.利用脂质体LipofectAMINE,研究了影响Vero细胞转染效率的参数如DNA和脂质体的用量,转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA-脂质体复合物的时间长度.通过检测报告基因β-半乳糖苷酶(β-gal)的表达,发现最高转染率只在一较窄范围内获得.β-gal的表达随脂质体量增加而显著增加.在标准转染条件下,增加DNA用量和延长细胞暴露时间反而使转染效率下降.转染细胞数量为4×104细胞/24孔时,细胞转染效率最高.

作者:钱锋;肖成祖

来源:生物技术通报 1998 年 5期

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作者:
钱锋;肖成祖
来源:
生物技术通报 1998 年 5期
标签:
基因表达 脂质体 转染 真核表达 Vero细胞
已有实验表明,细胞转染效率可能决定于DNA-脂质体复合物的形成以及所转染的细胞种类.利用脂质体LipofectAMINE,研究了影响Vero细胞转染效率的参数如DNA和脂质体的用量,转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA-脂质体复合物的时间长度.通过检测报告基因β-半乳糖苷酶(β-gal)的表达,发现最高转染率只在一较窄范围内获得.β-gal的表达随脂质体量增加而显著增加.在标准转染条件下,增加DNA用量和延长细胞暴露时间反而使转染效率下降.转染细胞数量为4×104细胞/24孔时,细胞转染效率最高.