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目的:研究巴斯德毕赤酵母表达的人抑瘤素M(hOSM)大规模发酵条件.方法:利用hOSM毕赤酵母高表达菌株,于试管水平进行发酵pH条件的摸索,以补料分批培养方式在80 L发酵罐中对hOSM工程菌进行3个批次的高密度发酵,控制和优化各种发酵条件,通过SDS-PAGE对发酵产物进行分析.结果:最终确定在pH5.0的FM21培养基中扩增菌体,待菌体密度达190 g· L-1时添加甲醇诱导,在发酵液pH 5.5的条件下,发酵温度稳定在28℃,通入空气的流量为2 vvm,转速为650 r·min-1,罐内压力为10 P,溶解氧保持在25%左右,甲醇流加速度在9.3 mL· h-1 ·L-1初始发酵液体积,诱导36 h时结束发酵,hOSM占分泌总蛋白的28%,产量达到280 mg·L-1.结论:应用hOSM工程菌能够进行稳定的发酵,为进行下一步生物学功能测定提供充足的物质基础.

作者:孔宁;高海成;刘国民;陈月;周余来;颜炜群

来源:吉林大学学报(医学版) 2012 年 38卷 5期

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作者:
孔宁;高海成;刘国民;陈月;周余来;颜炜群
来源:
吉林大学学报(医学版) 2012 年 38卷 5期
标签:
抑瘤素M 毕赤酵母 发酵
目的:研究巴斯德毕赤酵母表达的人抑瘤素M(hOSM)大规模发酵条件.方法:利用hOSM毕赤酵母高表达菌株,于试管水平进行发酵pH条件的摸索,以补料分批培养方式在80 L发酵罐中对hOSM工程菌进行3个批次的高密度发酵,控制和优化各种发酵条件,通过SDS-PAGE对发酵产物进行分析.结果:最终确定在pH5.0的FM21培养基中扩增菌体,待菌体密度达190 g· L-1时添加甲醇诱导,在发酵液pH 5.5的条件下,发酵温度稳定在28℃,通入空气的流量为2 vvm,转速为650 r·min-1,罐内压力为10 P,溶解氧保持在25%左右,甲醇流加速度在9.3 mL· h-1 ·L-1初始发酵液体积,诱导36 h时结束发酵,hOSM占分泌总蛋白的28%,产量达到280 mg·L-1.结论:应用hOSM工程菌能够进行稳定的发酵,为进行下一步生物学功能测定提供充足的物质基础.