目的:从胰岛素经典信号传导通路磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)角度探讨内脏脂肪素(visfatin)与2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)的关系. 方法:复苏、传代和诱导分化人源T2DM前脂肪细胞,构建 visfatin过表达载体,进行载体转化、培养和提取;以4个不同表达梯度(0.0、1.0、2.5和5.0 μg)转染传代脂肪细胞,以0.0 μg组为对照组,其余3组为观察组;Q-PCR法检测visfatin 、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)和 PI3K(P85α) mRNA表达水平,Western blotting法检测visfatin、IRS-1、IRS-2和PI3K(P85α) 蛋白表达水平及IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法测定细胞葡萄糖摄取率的变化. 结果:各组 visfatin mRNA及蛋白表达水平随转染浓度梯度升高而升高(P<0.01),所构建visfatin过表达载体有效. 随visfatin表达增加,各组IRS-1和PI3K(P85α) mRNA和蛋白表达水平以及IRS-1磷酸化程度均明显升高(P< 0.01),但IRS-2 mRNA和蛋白表达水平未出现明显变化(P>0.05).脂肪细胞的葡萄糖摄取率随visfatin表达增加而升高(P<0.05). 结论:体外脂肪细胞visfatin过表达可增加IRS-1和PI3K的表达水平.
作者：潘宝龙；巫玲；潘丽；马润玫
来源：吉林大学学报（医学版） 2017 年 43卷 2期
