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目的:探讨白花丹素(PLB)对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制.方法:体外培养肝癌HepG2细胞,建立索拉菲尼耐药细胞模型HepG2R,MTT法鉴定耐药倍数和筛选药物作用浓度及时间,依据其结果选择索拉菲尼和PLB作用浓度分别为5μmol·L-1和2μmol·L-1,各组药物作用时间为48 h.将HepG2R细胞随机分为对照组、索拉菲尼(5μmol·L-1)组、PLB(2μmol·L-1)组和索拉菲尼(5μmol·L-1)联合PLB(2μmol·L-1)组(联合组).MTT法检测各组细胞活力,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,Hoechst 33342实验和细胞流式术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平,计算Bax/Bcl-2比值.采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞中ROS水平.结果:随着索拉菲尼浓度的升高,HepG2和HepG2R细胞活力逐渐降低,耐药细胞HepG2R对索拉菲尼的半数抑制浓度(IC50)值是HepG2的4.5倍(P<0.05).随着PLB浓度升高和作用时间延长,耐药细胞对索拉菲尼敏感性升高.与对照组、索拉菲尼组和PLB组比较,联合组耐药细胞克隆形成率降低(P<0.05或P<0.01).Hoechst33342实验,对照组细胞核淡染,索拉菲尼组和PLB组细胞核少部分浓染、明亮;联合组细胞核大部分浓染,细胞核染色质固缩、明亮.流式

作者:朱德强;陈学军

来源:吉林大学学报(医学版) 2018 年 44卷 6期

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作者:
朱德强;陈学军
来源:
吉林大学学报(医学版) 2018 年 44卷 6期
标签:
白花丹素 肝肿瘤 索拉菲尼 HepG2细胞 细胞增殖 细胞凋亡
目的:探讨白花丹素(PLB)对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制.方法:体外培养肝癌HepG2细胞,建立索拉菲尼耐药细胞模型HepG2R,MTT法鉴定耐药倍数和筛选药物作用浓度及时间,依据其结果选择索拉菲尼和PLB作用浓度分别为5μmol·L-1和2μmol·L-1,各组药物作用时间为48 h.将HepG2R细胞随机分为对照组、索拉菲尼(5μmol·L-1)组、PLB(2μmol·L-1)组和索拉菲尼(5μmol·L-1)联合PLB(2μmol·L-1)组(联合组).MTT法检测各组细胞活力,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,Hoechst 33342实验和细胞流式术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平,计算Bax/Bcl-2比值.采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞中ROS水平.结果:随着索拉菲尼浓度的升高,HepG2和HepG2R细胞活力逐渐降低,耐药细胞HepG2R对索拉菲尼的半数抑制浓度(IC50)值是HepG2的4.5倍(P<0.05).随着PLB浓度升高和作用时间延长,耐药细胞对索拉菲尼敏感性升高.与对照组、索拉菲尼组和PLB组比较,联合组耐药细胞克隆形成率降低(P<0.05或P<0.01).Hoechst33342实验,对照组细胞核淡染,索拉菲尼组和PLB组细胞核少部分浓染、明亮;联合组细胞核大部分浓染,细胞核染色质固缩、明亮.流式