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目的:观察氯化钴 (CoCl2) 作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响, 并阐述其可能机制.方法:体外培养SKOV3细胞株, 随机分为对照组、CoCl2组、顺铂 (DDP) 组和CoCl2联用DDP (联合) 组, CoCl2组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后换普通细胞培养基培养20h, DDP组细胞以含10 mg·L-1 DDP的细胞培养基培养24h, 联合组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后更换含10mg·L-1 DDP的细胞培养基继续培养20h.MTT法检测各组细胞存活率, 免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α (HIF-1α) 和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 阳性表达强度, Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子 (Ca2+) 水平, 免疫蛋白印迹 (Western blotting) 法观察凋亡相关蛋白细胞色素C (cyto C) 、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase 3) 和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved caspase 3) 蛋白表达水平, Muse○R凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率.结果:与对照组比较, CoCl2组细胞存活率无明显变化 (P>0.05) , 其余2组细胞存活率明显下降 (P<0.05) ;且联合组高于DDP组 (P<0.05) .与对照组比较, CoCl2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强 (P<0.05) ;DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强 (P<0.05) .与对照组

作者:于洋;张岳培;王润泽;刘师兵;徐路;徐冶

来源:吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期

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作者:
于洋;张岳培;王润泽;刘师兵;徐路;徐冶
来源:
吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期
标签:
低氧诱导因子1α 氯化钴 诱导型一氧化氮合酶 钙离子 顺铂敏感性 SKOV3细胞 hypoxia-inducible factor-1α cobalt chloride inducible nitric oxide synthase ealciumion cisplatin sensitivity SKOV3 cells
目的:观察氯化钴 (CoCl2) 作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响, 并阐述其可能机制.方法:体外培养SKOV3细胞株, 随机分为对照组、CoCl2组、顺铂 (DDP) 组和CoCl2联用DDP (联合) 组, CoCl2组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后换普通细胞培养基培养20h, DDP组细胞以含10 mg·L-1 DDP的细胞培养基培养24h, 联合组细胞以200μmol·L-1 CoCl2作用4h后更换含10mg·L-1 DDP的细胞培养基继续培养20h.MTT法检测各组细胞存活率, 免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α (HIF-1α) 和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 阳性表达强度, Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子 (Ca2+) 水平, 免疫蛋白印迹 (Western blotting) 法观察凋亡相关蛋白细胞色素C (cyto C) 、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase 3) 和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved caspase 3) 蛋白表达水平, Muse○R凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率.结果:与对照组比较, CoCl2组细胞存活率无明显变化 (P>0.05) , 其余2组细胞存活率明显下降 (P<0.05) ;且联合组高于DDP组 (P<0.05) .与对照组比较, CoCl2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强 (P<0.05) ;DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强 (P<0.05) .与对照组