目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制.方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、CQ组和GEM耐药组+CQ(PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞为对照组.CCK-8法验证PANC1/GEM细胞株是否成功建立;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬小体数量,Western blotting法检测自噬标志蛋白胞浆型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅰ)、膜型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)和P62蛋白表达水平,分别应用JC-1法、DCFH-DA法和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法采用流式细胞仪检测各组细胞中线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平和细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)蛋白表达水平.结果:成功建立PANC1/GEM细胞株,与PANC1细胞比较,GEM对PANC1/GEM细胞的半数抑制浓度(IC50)明显增加(P<0.01).与对照组比较,PANC1/GEM组、CQ组和PANC1/GEM+CQ组细胞中自噬小体数量明显增加且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05),CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+C

作者：陆路；黎东明；王学国；宋丹；王太成；赵红岩；吴晓勇

来源：吉林大学学报（医学版） 2021 年 47卷 4期