目的:构建结核分枝杆菌MPT64真核表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:从H37Rv基因组中扩增出MPT64基因,经限制性内切酶消化后,定向插入pcDNA3.1(+)中,用脂质体法将pcDNA-MPT64转染COS-7细胞,采用RT-PCR、ELISA和斑点印迹法检测其表达.结果:扩增出的MPT64基因正确插入pcDNA3.1中,DNA序列测定无突变产生.重组质粒在COS-7细胞中表达了MPT64.结论:成功地构建了pcDNA-MPT64质粒,其真核表达的蛋白具有良好的抗原性,为进一步研究MPT64在抗结核菌感染中的预防作用奠定了基础.
作者：骆旭东；陈全；蒋英；江山；朱道银
来源：重庆医科大学学报 2003 年 28卷 2期
