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目的:探讨SiRNA-Smad3沉默人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblast,KFB)内Smad3基因后,对KFB细胞内纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达水平的影响.方法:分别用针对人Smad3 mRNA基因的特异性干扰片段和无关干扰片段转染体外原代培养的人KFB,经RT-PCR、Western blot、免疫组化、免疫荧光方法检测纤维连接蛋白(fibronectin)及Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ,Col Ⅰ)等KFB细胞外基质的合成和分泌情况.结果:75 nmol/L Smad3-siRNA特异性干扰片段转染KFB48h后KFB细胞内Col Ⅰ及FN合成和分泌较非特异性对照组及空白对照组明显降低.结论:Smad3-siRNA可特异性抑制KFB细胞中Smad3基因表达,并有效抑制体外培养的人原代KFB合成和分泌Col Ⅰ及纤维连接蛋白(Fibronectin,FN).

作者:刘波;果磊

来源:重庆医科大学学报 2010 年 35卷 4期

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作者:
刘波;果磊
来源:
重庆医科大学学报 2010 年 35卷 4期
标签:
RNA干扰 Smad3 瘢痕疙瘩 成纤维细胞
目的:探讨SiRNA-Smad3沉默人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblast,KFB)内Smad3基因后,对KFB细胞内纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达水平的影响.方法:分别用针对人Smad3 mRNA基因的特异性干扰片段和无关干扰片段转染体外原代培养的人KFB,经RT-PCR、Western blot、免疫组化、免疫荧光方法检测纤维连接蛋白(fibronectin)及Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ,Col Ⅰ)等KFB细胞外基质的合成和分泌情况.结果:75 nmol/L Smad3-siRNA特异性干扰片段转染KFB48h后KFB细胞内Col Ⅰ及FN合成和分泌较非特异性对照组及空白对照组明显降低.结论:Smad3-siRNA可特异性抑制KFB细胞中Smad3基因表达,并有效抑制体外培养的人原代KFB合成和分泌Col Ⅰ及纤维连接蛋白(Fibronectin,FN).