目的 研究短时间应用顺铂是否会引起宫颈癌细胞株HCE1发生上皮间质转化(EMT),明确Twist1是否为调控顺铂诱导宫颈癌细胞EMT的关键转录因子.方法 采用倒置相差显微镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)法和免疫组织化学法分别从细胞形态、生长曲线和标志性蛋白E-cadherin、vimentin的表达情况.以HCE1细胞株为对照组,加顺铂组(终浓度0.1 mg/L)为实验组,观察加入顺铂24、48、72、96 h后,宫颈癌细胞株HCE1是否发生EMT及其时间点.采用Transwell小室实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力,免疫组织化学方法检测P糖蛋白(P-gp)蛋白表达证实EMT发生.半定量RT-PCR方法比较EMT前、后Twist1表达.结果 低剂量顺铂处理HCE1 72 h后,HCE1细胞形态发生EMT的改变;上皮细胞标志性蛋白细胞黏附分子(E-cadherin)表达减少、间质细胞标志性蛋白Vimentin表达增强,P-gp蛋白表达增强;对照组HCE1平均穿膜细胞数为(39.000 0±2.828 4)个,EMT组HCE1平均穿膜细胞数为(100.166 7±3.868 7)个;RT-PCR法测得Twist1/内参OD比值在对照组0.200 2±0.000 9,EMT组0.615 6±0.005 1,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低剂量顺铂早期即可诱导HCE1发生EMT,发生EMT的HCE1细胞体外侵袭能力和耐药性增强,Twist1是调控顺铂诱导宫颈癌细胞EMT的关键转录因子.

作者：杨丞；饶翔；丁莉利；王明华

来源：重庆医学 2013 年 42卷 15期