目的 上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞丢失其上皮细胞特性获得间质细胞特征的过程,与多种抗肿瘤药物耐药相关.本研究通过构建宫颈癌顺铂耐药细胞系SiHa/DDP,检测其与亲本细胞之间EMT相关分子的表达差异,建立EMT与宫颈癌顺铂化疗敏感性和相关性模型,为宫颈癌化疗耐药研究提供基础.方法 梯度药物浓度持续诱导建立SiHa耐药细胞系SiHa/DDP,四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测耐药指数,划痕实验及Transwell实验检测体外迁移及侵袭能力,Real-Time PCR及蛋白质印迹法检测EMT相关基因表达.结果 建立耐药细胞系SiHa/DDP(RI=4.48),该细胞侵袭及迁移能力愈合百分比为(64.89±3.91)％,较亲本细胞(17.11±4.49)％增强,t=-12.738,P=0.001;穿膜细胞计数为281.33±27.74,较新本细胞150.33±22.3增强,t=-6.375,P=0.003.mRNA水平上SiHa/DDP细胞E-cadherin,Nano及Oct4表达较SiHa细胞降低,而Snail,Vimentin及N-cadherin表达较SiHa细胞增高,蛋白水平上在顺铂(DDP)浓度0.4μg/mL条件下稳定生长的SiHa细胞株,E-cadherin下调,Snail上调.当DDP浓度稳定至2.0 μg/mL时,检测仍可见E-cadherin下调,但Snail蛋白表达消失,而GSK-3β表达明显增高.结论 耐药细胞系SiHa/DDP呈现EM

作者：杨乐；郭晓波；郭亮；万贝贝；张丹；韩苏夏

来源：中华肿瘤防治杂志 2018 年 25卷 12期