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目的 探讨第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物蛋白(PTEN)对小鼠原代肝细胞蛋白激酶B/糖原合酶激酶-3β(Akt/GSK-3β)信号通路的影响.方法 采用两步胶原酶灌注法分离小鼠原代肝细胞,均分为4组:阴性对照组(NC-C组)、阴性对照白细胞介素-6(IL-6)组(NC-IL组)、siR-996对照组(996-C组)、siR-996与IL-6组(996-IL组).采用HiPerFect转染试剂将siRNA-996转入小鼠原代肝细胞,24 h后提取蛋白,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测各组Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、GSK-3β、磷酸化GSK-3β (p-GSK-3β)、PTEN蛋白水平.结果 在PTEN蛋白水平上,与NC-C组相比,NC-IL组升高(P<0.05),996-C组和996-IL组降低(P<0.01).在p-Akt/Akt上,与NC-C组相比,NC-IL组降低(P<0.05),996-C组和996-IL组升高(P<0.05).在p-GSK-3β/GSK-3β上,与NC-C组相比,NC-IL组降低(P<0.05),996-C组和996-IL组升高(P<0.01).结论 PTEN基因沉默可逆转IL-6对小鼠原代肝细胞Akt/GSK-3β信号通路的抑制,增强小鼠原代肝细胞Akt/GSK-3β信号通路的表达.

作者:周龙;王立林;胡序怀;李亚文

来源:重庆医学 2019 年 48卷 7期

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作者:
周龙;王立林;胡序怀;李亚文
来源:
重庆医学 2019 年 48卷 7期
标签:
PTEN磷酸水解酶 小鼠原代肝细胞 RNA干扰 蛋白激酶B 糖原合成酶激酶-3β
目的 探讨第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物蛋白(PTEN)对小鼠原代肝细胞蛋白激酶B/糖原合酶激酶-3β(Akt/GSK-3β)信号通路的影响.方法 采用两步胶原酶灌注法分离小鼠原代肝细胞,均分为4组:阴性对照组(NC-C组)、阴性对照白细胞介素-6(IL-6)组(NC-IL组)、siR-996对照组(996-C组)、siR-996与IL-6组(996-IL组).采用HiPerFect转染试剂将siRNA-996转入小鼠原代肝细胞,24 h后提取蛋白,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测各组Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、GSK-3β、磷酸化GSK-3β (p-GSK-3β)、PTEN蛋白水平.结果 在PTEN蛋白水平上,与NC-C组相比,NC-IL组升高(P<0.05),996-C组和996-IL组降低(P<0.01).在p-Akt/Akt上,与NC-C组相比,NC-IL组降低(P<0.05),996-C组和996-IL组升高(P<0.05).在p-GSK-3β/GSK-3β上,与NC-C组相比,NC-IL组降低(P<0.05),996-C组和996-IL组升高(P<0.01).结论 PTEN基因沉默可逆转IL-6对小鼠原代肝细胞Akt/GSK-3β信号通路的抑制,增强小鼠原代肝细胞Akt/GSK-3β信号通路的表达.