目的:探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的新方法.方法:应用长链RT-PCR技术扩增3个X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因编码区全长,再分4个片段进行二次PCR,并对PCR产物直接测序;应用巢式PCR对ABCD1基因相应区域进行扩增,其中第一轮PCR产物覆盖ABCD1基因从外显子6至3′非编码区的一个大片段,并对PCR产物进行测序,分析患者的基因组DNA,进一步确证其ABCD1基因突变.结果:在3个X-ALD患者的ABCD1基因上,存在3个不同的碱基改变(2235C>T,2065C>T和2190A>T),分别造成2个错义突变(R617C和P560L)和1个无义突变(K602X).结论:应用巢式PCR能快速、有效地排除X-ALD分子诊断中ABCD1假基因的干扰.
作者：柯龙凤；黄梁浒；王志红；谢海花；杨渤生；朱忠勇；兰风华
来源：第二军医大学学报 2009 年 30卷 2期
