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目的 探讨脊髓2型大麻素受体(CB2R)与小胶质细胞活化对神经病理性疼痛小鼠痛觉过敏的影响.方法 若干健康雄性C57/BL小鼠随机分为6组:假手术组、脊神经结扎(SNL)组、SNL+CB2R激动剂(AM1241)组、SNL+小胶质细胞抑制剂(米诺环素)组、SNL+CB2R小干扰RNA(siRNA)组(SNL+siRNA组)、SNL+CB2R小干扰RNA+小胶质细胞抑制剂组(SNL+siRNA+米诺环素组).采用SNL方法建立神经病理性疼痛小鼠模型.采用蛋白质印迹法检测小鼠脊髓组织中CB2R和小胶质细胞活化特异蛋白钙离子结合调节因子1(IBA-1)的蛋白表达,Von Frey纤维丝测定小鼠机械性痛阈,免疫荧光观察脊髓背角IBA-1荧光定量表达,qRT-PCR测定小鼠脊髓透析液中炎性因子释放水平,电生理技术观察CB2R激动剂对脊髓背角自发性抑制性突触后电流(sIPSC)的影响.结果 与假手术组相比,SNL组小鼠脊髓组织中CB2R表达减少(P<0.0125),痛阈降低(P<0.0167),IBA-1荧光定量和蛋白表达均增高(P均<0.0083),炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达均增加(P均<0.0083).鞘内注射CB2R激动剂AM1241或小胶质细胞抑制剂米诺环素后,与SNL组相比,SNL+AM1241、SNL+米诺环素组小鼠的痛阈均升高(P均<0.0083),IBA-1荧光定量和蛋白表达均降低(P均<0.0083),TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达均减少(P均<0.0083).si

作者:孔二亮;吴飞翔;拜云虎;张杨;钟成跃;凤旭东

来源:第二军医大学学报 2020 年 41卷 10期

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作者:
孔二亮;吴飞翔;拜云虎;张杨;钟成跃;凤旭东
来源:
第二军医大学学报 2020 年 41卷 10期
标签:
大麻酚受体CB2 小神经胶质细胞 神经病理性疼痛 炎症 脊髓 痛觉过敏
目的 探讨脊髓2型大麻素受体(CB2R)与小胶质细胞活化对神经病理性疼痛小鼠痛觉过敏的影响.方法 若干健康雄性C57/BL小鼠随机分为6组:假手术组、脊神经结扎(SNL)组、SNL+CB2R激动剂(AM1241)组、SNL+小胶质细胞抑制剂(米诺环素)组、SNL+CB2R小干扰RNA(siRNA)组(SNL+siRNA组)、SNL+CB2R小干扰RNA+小胶质细胞抑制剂组(SNL+siRNA+米诺环素组).采用SNL方法建立神经病理性疼痛小鼠模型.采用蛋白质印迹法检测小鼠脊髓组织中CB2R和小胶质细胞活化特异蛋白钙离子结合调节因子1(IBA-1)的蛋白表达,Von Frey纤维丝测定小鼠机械性痛阈,免疫荧光观察脊髓背角IBA-1荧光定量表达,qRT-PCR测定小鼠脊髓透析液中炎性因子释放水平,电生理技术观察CB2R激动剂对脊髓背角自发性抑制性突触后电流(sIPSC)的影响.结果 与假手术组相比,SNL组小鼠脊髓组织中CB2R表达减少(P<0.0125),痛阈降低(P<0.0167),IBA-1荧光定量和蛋白表达均增高(P均<0.0083),炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达均增加(P均<0.0083).鞘内注射CB2R激动剂AM1241或小胶质细胞抑制剂米诺环素后,与SNL组相比,SNL+AM1241、SNL+米诺环素组小鼠的痛阈均升高(P均<0.0083),IBA-1荧光定量和蛋白表达均降低(P均<0.0083),TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达均减少(P均<0.0083).si