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[目的]研究用电穿孔转染强力霉素调控的人胰岛素原基因表达对糖尿病小鼠的降糖作用.[方法]构建prTA-tet4-rhINS质粒;以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导昆明小鼠成糖尿病模型.成模小鼠分为3组:①ET-ptetINS组(42只):为强力霉素调控的胰岛素质粒INS(prTA-tet4-rhINS)电穿孔组,②ET-pLNCX组(35只):为不含INS基因的空质粒pLNCX电穿孔对照组;③Nake-ptetINS组(48只):为强力霉素调控的胰岛素质粒INS单纯肌肉注射组.各组转染后立即予饮浓度为2 mg/mL 强力霉素(Doxycycline,Dox)水.检测末梢血糖,血清人真胰岛素及小鼠肌肉组织中人胰岛素原基因mRNA表达情况.[结果]胰岛素基因肌肉转移后使糖尿病小鼠血糖下降,体重稳定增加,尿量减少,血清中检测到较高水平真胰岛素;质粒停止表达后重复注射仍然有效.电穿孔转染降糖作用可达9周,而直接注射组约为7周.电穿孔组转染成功率较直接肌肉注射更高(59.52

作者:刘海霞;李鸿;张雪杨;苏本利

来源:大连医科大学学报 2010 年 32卷 6期

知识库介绍

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作者:
刘海霞;李鸿;张雪杨;苏本利
来源:
大连医科大学学报 2010 年 32卷 6期
标签:
电穿孔 胰岛素 糖尿病 四环素调控系统 基因治疗
[目的]研究用电穿孔转染强力霉素调控的人胰岛素原基因表达对糖尿病小鼠的降糖作用.[方法]构建prTA-tet4-rhINS质粒;以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导昆明小鼠成糖尿病模型.成模小鼠分为3组:①ET-ptetINS组(42只):为强力霉素调控的胰岛素质粒INS(prTA-tet4-rhINS)电穿孔组,②ET-pLNCX组(35只):为不含INS基因的空质粒pLNCX电穿孔对照组;③Nake-ptetINS组(48只):为强力霉素调控的胰岛素质粒INS单纯肌肉注射组.各组转染后立即予饮浓度为2 mg/mL 强力霉素(Doxycycline,Dox)水.检测末梢血糖,血清人真胰岛素及小鼠肌肉组织中人胰岛素原基因mRNA表达情况.[结果]胰岛素基因肌肉转移后使糖尿病小鼠血糖下降,体重稳定增加,尿量减少,血清中检测到较高水平真胰岛素;质粒停止表达后重复注射仍然有效.电穿孔转染降糖作用可达9周,而直接注射组约为7周.电穿孔组转染成功率较直接肌肉注射更高(59.52