T-bet和c-FLIP双基因共表达质粒的构建及生物学活性检测-临床诊疗知识库

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作者：

伊远学；李宝金；刘晓平；张超；张维；冯子毅；冷希圣

来源：

第三军医大学学报 2008 年 30卷 24期

标签：

T-bet基因 c-FLIP基因 pEGFP-C1 T淋巴细胞生物学活性共表达

目的构建携带T-bet和c-FLIP双基因的真核表达载体及检测其生物学活性.方法采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出T-bet和c-FLIP cDNA,利用pIRES和pEGFP-C1,构建T-bet和c-FLIP双基因真核表达载体pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP.采用非脂质体的脂质型介导载体将pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP转染至外周血淋巴细胞,观察T-bet和c-FLIP在外周血淋巴细胞中的表达,并检测其诱导淋巴细胞的抗凋亡作用及Th1/Th2细胞偏移.结果成功构建pEGFPT-bet-IRES-c-FLIP质粒,运用非脂质体的脂质型介导载体将该质粒转染淋巴细胞,其转染率为34.6

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