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目的 探讨热休克蛋白B1(heat shock protein B1,HSPB1)在U251细胞株及其干细胞中差异性表达对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用无血清培养基培养U251细胞,获得U251干细胞;应用细胞免疫荧光染色法检测CD133和nestin鉴定胶质瘤干细胞;应用iTRAQ技术对U251细胞株及其干细胞进行HSPs差异性分析;应用MTT法、Western blot和RT-PCR观察经卡莫司汀干预后,肿瘤细胞凋亡与HSPB1蛋白、基因表达变化的关系.结果 在未经卡莫司汀干预的胶质瘤与胶质瘤干细胞的HSPB1的蛋白比值为0.523;经卡莫司汀干预U251及其干细胞后,HSPB1蛋白含量分别升高了1.4、3.3倍,HSPB1 mRNA分别升高1.5、3.6倍,经相同浓度的卡莫司汀干预后的U251细胞生长受到抑制,而U251干细胞无明显抑制.结论 HSPB1参与U251胶质瘤干细胞化疗抵抗过程,对肿瘤细胞增殖、凋亡起着重要的调控作用.

作者:廖鹏;程远

来源:第三军医大学学报 2011 年 33卷 20期

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作者:
廖鹏;程远
来源:
第三军医大学学报 2011 年 33卷 20期
标签:
细胞系,肿瘤 肿瘤干细胞 热休克蛋白质类,小分子
目的 探讨热休克蛋白B1(heat shock protein B1,HSPB1)在U251细胞株及其干细胞中差异性表达对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用无血清培养基培养U251细胞,获得U251干细胞;应用细胞免疫荧光染色法检测CD133和nestin鉴定胶质瘤干细胞;应用iTRAQ技术对U251细胞株及其干细胞进行HSPs差异性分析;应用MTT法、Western blot和RT-PCR观察经卡莫司汀干预后,肿瘤细胞凋亡与HSPB1蛋白、基因表达变化的关系.结果 在未经卡莫司汀干预的胶质瘤与胶质瘤干细胞的HSPB1的蛋白比值为0.523;经卡莫司汀干预U251及其干细胞后,HSPB1蛋白含量分别升高了1.4、3.3倍,HSPB1 mRNA分别升高1.5、3.6倍,经相同浓度的卡莫司汀干预后的U251细胞生长受到抑制,而U251干细胞无明显抑制.结论 HSPB1参与U251胶质瘤干细胞化疗抵抗过程,对肿瘤细胞增殖、凋亡起着重要的调控作用.