目的 探讨RNAi沉默MACC1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的影响及相关的分子机制.方法 化学合成针对MACC1基因的荧光标记的siRNA-FAM,利用siRNA转染试剂将MACC1特异性siRNA-FAM转染至乳腺癌MCF-7细胞；采用RT-PCR检测siRNA对MACC1 mRNA表达的影响,Western blot检测siRNA对MACC1蛋白合成的影响；MTT实验检测沉默MACC1基因后对MCF-7细胞增殖活性的影响；Transwell迁移实验检测沉默MACC1基因后对MCF-7细胞迁移能力的影响；Western blot检测干扰MACC1对S100A4及vimentin蛋白合成的影响.结果 MACC1基因在乳腺癌MCF-7细胞高表达；针对MACC1基因的siRNA转染MCF-7细胞48 h后,siRNA组与空白对照组比较,能够显著抑制MACC1基因表达和蛋白合成,抑制效率分别为81％和75％；MACC1特异性siRNA转染MCF-7细胞24、48、72 h后,MMT结果显示与空白对照组比较,siRNA组能够抑制细胞生长,并随着时间延长抑制明显(P＜0.05)；转染MCF-7细胞48 h后,Transwell迁移实验结果显示siRNA组与空白对照组比较,穿过小室细胞数明显降低,其能有效抑制MCF-7细胞迁移(P＜0.05);siRNA组与空白对照组相比,S100A4和vimentin表达降低(P＜0.05).以上实验阴性对照组和空白对照组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 利用特异性siRNA干扰MACC1基因

作者：蒋国燕；李瑾；施露；曹进；张献全

来源：第三军医大学学报 2013 年 35卷 18期