目的 研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1的P364L突变型(e.1091 C＞T)对催化非结合胆红素葡糖醛酸化的影响.方法 构建含有UGT1A1编码序列的野生型和P364L突变型质粒,转染HEK293细胞,表达野生型与突变型蛋白;Western blot验证野生型和P364L突变型蛋白表达情况;超声裂解细胞提取表达蛋白;设计两组反应,野生型为对照组,P364L突变型为实验组,分别催化非结合胆红素反应,HPLC定量检测两组中非结合胆红素浓度变化情况.结果 对照组中非结合胆红素的浓度随着时间的延长呈逐渐下降的趋势,而结合胆红素的浓度随时间延长逐渐升高;实验组中非结合胆红素浓度下降程度远小于对照组,未见明显的结合胆红素峰值;反应30 min时计算酶的活性P364L突变型为野生型的14.2％.结论 突变酶UGT1A1-P364L催化非结合胆红素能力较野生型明显降低.
作者：唐怡；邓国宏；李露锋；郭艳；吴全新；毛青
来源：第三军医大学学报 2015 年 37卷 10期
