目的 探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用.方法 传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数.应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,qPCR)及Western blot检测对比同等厄洛替尼浓度(0.1、0.2、0.3 μmol/L)处理条件下,Rab25在两种细胞中的mRNA及蛋白表达差异,并以免疫荧光法定位Rab25在细胞中的分布.用小干扰RNA(siRab25)转染PC9/ER细胞,并以流式细胞仪及CCK-8法分别检测Rab25敲减后PC9/ER细胞的增殖指数(proliferation index,PI)及厄洛替尼IC50值的变化.结果 PC9/ER细胞的耐药指数是68.82 ±21.42.相同厄洛替尼浓度处理48 h后,PC9/ER细胞Rab25 mRNA及蛋白水平均高于PC9细胞(P＜0.05),增高的Rab25蛋白主要表达于细胞膜.而且PC9/ER细胞Rab25蛋白水平随厄洛替尼处理浓度(0.1、0.2、0.3 μmol/L)递增而增高.siRab25在PC9/ER细胞中成功转染后,转染组的厄洛替尼IC50值及PI均明显低于对照组(P＜0.05).结论 Rab25在NSCLC厄洛替尼获得性耐药细胞中高表达,起着促进耐药的作用.
作者：王旭东；王江；赵凤仪；韩静；孙建国；陈正堂
来源：第三军医大学学报 2016 年 38卷 7期
