目的 建立对克唑替尼耐药的非小细胞肺癌细胞株,并对其耐药性进行鉴定,初步筛选耐药相关的miRNAs.方法 采用克唑替尼药物浓度递增的方法建立人耐药细胞株NCI-H3122CR,并通过细胞生长曲线、药物敏感性、细胞凋亡和细胞周期的检测评价NCI-H3122CR细胞株的耐药性.第二代基因测序法和RT-PCR检测耐药后microRNA表达量的变化.结果 成功建立了克唑替尼耐药细胞株H3122CR,耐药指数为9.86.流式细胞仪检测结果显示H3122CR细胞凋亡率比H3122细胞低,并呈现浓度依赖性的趋势.耐药细胞株的细胞周期分布产生了显著的变化.当前的第二代测序和RT-PCR检测结果显示:miR-30a-5 p、miR-374c-5p和miR-125b-5p表达上调,miR-31-5p、miR-10a6p和miR-200c-3p表达下调.结论 构建的H3122CR耐药细胞模型对克唑替尼有一定的耐药性,并且耐药后部分miRNAs表达量产生显著的变化.
作者:刘晓;贾燕花;张可;刘皈阳
来源:第三军医大学学报 2016 年 38卷 7期