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目的 探讨大胞饮途径是否介导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内脂滴聚集.方法 组织块贴壁培养法培养VSMCs;免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;天然低密度脂蛋白(nLDL,50、200、800 μg/mL)及脂多糖(LPS,200 ng/mL)刺激培养VSMCs,构建泡沫细胞模型;流式细胞术检测VSMCs对大胞饮示踪剂Lucifer Yellow (LY)和DiI标记的nLDL (DiI-nLDL)的摄取;油红O染色鉴定VSMCs内脂滴聚集.结果 ①LPS刺激可促进VSMCs对nLDL呈浓度依赖性地摄取增加,导致细胞内脂滴的聚集逐渐增多.②200 ng/mL LPS刺激VSMCs 6 h,VSMCs对LY的摄取增加75%(P<0.01),对DiI-nLDL的摄取增加76% (P <0.01).③应用胞饮抑制剂LY294002后,VSMCs对DiI-nLDL的摄取减少约29% (P <0.01),VSMCs内脂滴聚集明显减少.结论 LPS刺激诱导VSMCs通过大胞饮途径摄取nLDL,从而增加细胞内脂滴的聚集,促进平滑肌源性泡沫细胞形成.

作者:陈雪;王旭;郭露;李敬诚;张莉莉

来源:第三军医大学学报 2018 年 40卷 2期

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作者:
陈雪;王旭;郭露;李敬诚;张莉莉
来源:
第三军医大学学报 2018 年 40卷 2期
标签:
泡沫细胞 血管平滑肌细胞 大胞饮 天然低密度脂蛋白 脂多糖 foam cells vascular smooth muscle cells micropinocytosis native low-density lipoprotein lipopolysaccharide
目的 探讨大胞饮途径是否介导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内脂滴聚集.方法 组织块贴壁培养法培养VSMCs;免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;天然低密度脂蛋白(nLDL,50、200、800 μg/mL)及脂多糖(LPS,200 ng/mL)刺激培养VSMCs,构建泡沫细胞模型;流式细胞术检测VSMCs对大胞饮示踪剂Lucifer Yellow (LY)和DiI标记的nLDL (DiI-nLDL)的摄取;油红O染色鉴定VSMCs内脂滴聚集.结果 ①LPS刺激可促进VSMCs对nLDL呈浓度依赖性地摄取增加,导致细胞内脂滴的聚集逐渐增多.②200 ng/mL LPS刺激VSMCs 6 h,VSMCs对LY的摄取增加75%(P<0.01),对DiI-nLDL的摄取增加76% (P <0.01).③应用胞饮抑制剂LY294002后,VSMCs对DiI-nLDL的摄取减少约29% (P <0.01),VSMCs内脂滴聚集明显减少.结论 LPS刺激诱导VSMCs通过大胞饮途径摄取nLDL,从而增加细胞内脂滴的聚集,促进平滑肌源性泡沫细胞形成.