目的 建立有效的皮肤光老化HaCaT细胞模型,初步探索可能涉及的老化相关信号转导途径.方法 以30 mJ/cm2中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐照HaCaT细胞,采用CCK-8检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-[β-gal)染色分析各组阳性细胞百分比,qRT-PCR和Western blot检测衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达,细胞免疫荧光检测p21蛋白胞内定位.结果 30 mJ/cm2 UVB辐照后,HaCaT细胞增殖率均较对照组降低(P＜0.01),G2期细胞比例较对照组增加(P＜0.05),细胞SA-β-gal染色阳性率明显高于对照组(P＜0.01).qRT-PCR和Western blot检测结果均显示:辐照后,HaCaT细胞中p53、p16表达明显升高,p21表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01).细胞免疫荧光结果显示:给予30 mJ/cm2 UVB辐照导致p21发生明显的核移位.结论 30 mJ/cm2 UVB辐照可成功构建光老化HaCaT细胞模型,其机制可能是通过增强p21核定位及激活p16通路诱导了细胞衰老的进程.
作者：刘川；黄欣；王萍；潘芸；曹迪；刘依依；陈爱军
来源：第三军医大学学报 2019 年 41卷 17期
