目的 探讨共培养下乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中细胞质G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factors 2,FGF2)的表达调控机制及其对肿瘤细胞侵袭能力的影响.方法 细胞免疫荧光法检测单独及与雌激素受体阳性(estrogen receptor positive,ER+)乳腺癌MCF-7或ER阴性(ER-)乳腺癌MDA-MB-468细胞共培养下CAFs中GPER的细胞内定位;荧光定量PCR法与ELISA法分别检测不同处理后CAFs细胞内FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌水平;Western blot法检测CAFs细胞中GPER下游ERK、AKT及PKA信号通路活化情况;Transwell小室实验检测不同药物处理下乳腺癌细胞侵袭能力的改变.结果 两种亚型的乳腺癌细胞均可诱导CAFs中GPER由细胞核转位入细胞质.共培养条件下,17-β雌二醇(E2)可显著促进CAFs中FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌量,突变GPER氨基酸序列中的核输出信号(nucleus export signal,NES)可显著抑制以上变化(P<0.05).CAFs单独培养下则无以上现象.同时,E2处理共培养下CAFs细胞后显著活化细胞内GPER/AKT与GPER/PKA信号通路,促进下游p-AKT与p-PKA的蛋白表达(P<0.05).突变GPER中NES序列后可显著抑制下游PKA信号的

作者：余腾骅；王智亮；彭美茜；邱宇安

来源：第三军医大学学报 2019 年 41卷 18期