目的构建人源性胶质瘤噬菌体抗体库.方法经逆转录、套式PCR从脑胶质瘤患者血淋巴细胞中扩增出抗体轻链Vκ和重链VH基因.先构建Vκ基因库,并使连接Vκ和VH基因的Linker与Vκ基因连接,再将VH基因克隆入Vκ基因库,即构建成约为3.5×106 的单链抗体(ScFv)基因库.以Loxp511序列替代Linker 序列,并将ScFv克隆入pDNA5内进行重组、鉴定,得到新的ScFv噬菌体抗体库. 结果表明原初级噬菌体抗体库经Cre-Loxp511系统重组后库容量达到8.5×108,部分测序证实抗体基因与人源性抗体基因数据库同源 . 结论利用体内重组系统明显提高了所建的抗体库容量,为进一步筛选特异性人源性抗脑胶质瘤ScFv奠定了基础.
作者：王彦刚；章翔；费舟；张剑宁；付洛安；刘卫平；赵爱志；郭庆东；刘先珍
来源：第四军医大学学报 2002 年 23卷 23期
