目的:构建具有良好多样性的人尘肺病噬菌体单链抗体( ScFv)库.方法:收集25例尘肺病患者外周血标本共50 mL,密度梯度离心法分离淋巴细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录后参考文献设计并合成半巢式PCR引物,扩增抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,Linker连接VH和VL,继而连接到噬菌体载体pCANTAB-SE中,连接产物转入感受态大肠杆菌TG1,超感染辅助噬菌体M13KO7,构建噬菌体ScFv库.结果:扩增出VH和VL基因序列并有效地连接,经转化和超感染,构建了库容为2.4x107pfu/mL的ScFV库.结论:成功构建人尘肺病噬菌体ScFV库.
作者：翟伟；郝长付；高彬；姚武
来源：郑州大学学报（医学版） 2011 年 46卷 6期
