目的: 构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库.方法: 从正常人外周血中分离淋巴细胞, 以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因, 以重叠延伸PCR将VH、 VL组装成scFv基因, 并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中.以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1, 构建人源天然噬菌体抗体库, 测序分析抗体基因的家族信息和多样性, 并用多种抗原对其进行筛选.结果: 获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库.分别用5种抗原对其进行筛选, 均可获得特异性噬菌体抗体的富集.结论: 成功地构建了一个多样性良好的人源天然噬菌体抗体库, 可用于制备具有应用前景的人源抗体.
作者：王晋；罗文新；李利峰；陈瑛炜；王明桥；张军；夏宁邵
来源：细胞与分子免疫学杂志 2006 年 22卷 6期
