为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞(PBL)中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因.先构建Vκ基因库,并使连接Vκ和VH基因的linker与Vκ基因连接,再将VH基因克隆入Vκ基因库,即构建成功单链抗体(ScFv)库.随机挑取菌落鉴定,测序表明从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因,并构建了库容量约为2×106 的ScFv噬菌体抗体库.随机挑取克隆的测序表明,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性,证明所克隆的基因属人抗体可变区基因. 结果表明实验构建成人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库,为进一步筛选人源性抗脑胶质瘤抗体奠定了基础.
作者：王彦刚；章翔；阎岩；付洛安；刘卫平；吴景文；郭庆东；刘先珍
来源：解放军医学杂志 2001 年 26卷 11期
