目的: 构建结核分枝杆菌(H37Rv)Ag85B-MPT64融合基因并在真核细胞中表达.方法: 采用序贯PCR(gene SOEing)法将Ag85B和MPT64编码基因用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser)3经PCR扩增融合,定向克隆入pcDNA3.1(+)中.采用脂质体转染法将pcDNA/Ag85B-MPT64(pcDNA/AM)转染COS-7细胞,用RT-PCR、ELISA和斑点印迹法检测其表达.结果: Ag85B-MPT64融合基因经双向DNA序列测定,碱基突变率为0.11
作者:骆旭东;陈全;蒋英;江山;朱道银
来源:第四军医大学学报 2003 年 24卷 12期