目的:克隆survivin基因、原核表达并鉴定. 方法:从培养的人喉癌Hep-2细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得survivin基因. 将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,测序、鉴定. 将测序正确的survivin基因亚克隆到pRSET-c载体中,构建survivin表达载体,IPTG诱导表达4~5 h,做SDS-PAGE分析,鉴定survivin蛋白的表达. 结果:DNA测序证明,获得了survivin基因,其序列与GeneBank中报道序列完全一致. SDS-PAGE分析表明,survivin蛋白获得高效表达,其相对分子质量为16.5×103,表达量约占菌体总蛋白的30
作者:郭万宏;成诗银;张惠中;林芳
来源:第四军医大学学报 2004 年 25卷 5期