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目的:克隆SRG基因、原核表达并鉴定.方法:从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因.将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定.将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a+)表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h~6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达.结果:DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致.SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25

作者:闫露;高萍;栗艳;鱼兵

来源:现代肿瘤医学 2007 年 15卷 3期

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作者:
闫露;高萍;栗艳;鱼兵
来源:
现代肿瘤医学 2007 年 15卷 3期
标签:
sRG基因 逆转录 PCR 基因表达
目的:克隆SRG基因、原核表达并鉴定.方法:从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因.将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定.将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a+)表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h~6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达.结果:DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致.SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25