目的:克隆HCCR - 2基因、原核表达并鉴定.方法:从培养的人骨肉瘤细胞SOSP - 9607中提取总RNA,经RT - PCR获得HCCR - 2基因.将该基因克隆到pGEM - T - Easy克隆载体中,测序、鉴定.将测序正确的HCCR - 2基因亚克隆到pET - 28a(+)表达载体中,构建HCCR - 2表达载体,IPTG诱导表达1~5 h,做SDS - PAGE分析,鉴定HCCR - 2蛋白的表达.结果:DNA测序证明,获得了HCCR - 2基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致.SDS - PAGE分析表明,HCCR - 2蛋白获得高效表达,其相对分子质量为39 kDa,表达量约占菌体总蛋白的25
作者:栗艳;闫露;鱼兵;沈敏
来源:西南国防医药 2007 年 17卷 1期