目的:构建人类维甲酸受体α基因的高效表达系统.方法:提取人肝组织总RNA,RT-PCR扩增Retinoid X receptor α(RXRα)的cDNA.将其克隆入原核表达载体pETDuet-1,构建重组表达载体pETDuet-1 /RXRα.将已构建好的表达载体pETDuet-1 /RXRα重组质粒转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-8-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western Blot鉴定表达产物.结果:重组载体pETDuet-1 /RXRα经限制性核酸内切酶BglⅡ和 AatⅡ双酶切鉴定,得到符合预期大小的核酸片段.SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为RXRα.并对重组质粒pETDuet-1 /RXRα在BL21菌株的表达效率进行评价,目的蛋白占菌体总蛋白的百分比为65.8
作者：郭林梅；韩跃武；王君霞
来源：西北国防医学杂志 2008 年 29卷 5期
