目的 探讨低剂量氢醌(HQ)诱导人胚肺成纤维细胞(HLF)损伤耐受差异表达的基因.方法 参照本实验室用MTT法所得的HQ对HLF毒性的剂量效应关系,选择100 pmol/L的HQ为低剂量,100μmol/L的HQ为高剂量,按以下方式对细胞进行染毒:空白对照、低剂量、高剂量、损伤耐受组(先用低剂量预刺激24 h,再用高剂量刺激6 h,然后用荧光差异显示PCR寻找不同方式刺激差异表达的基因,并对差异表达基因进行克隆、鉴定同源性比较.结果 按方法所示的方式处理细胞,处理完毕后提取各组细胞总RNA,进行荧光差异显示PCR,找到33个差异条带.对其中的8个差异条带进行克隆鉴定同源性比较,发现其中1个已知基因,7个未知基因.结论 用荧光差异显示PCR方法寻找HQ诱导HLF损伤耐受过程差异表达的基因,通过鉴定基因,为进一步研究低剂量HQ诱导HLF损伤耐受的机制提供科学依据.
作者:卫秦芝;庄志雄
来源:南方医科大学学报 2006 年 26卷 8期