目的寻找低剂量三氯乙烯(TCE)诱导人正常肝细胞(L-02)损伤耐受差异表达的基因.方法参照本实验室用MTT法所得的TCE对L-02毒性剂量-效应关系,选择5μmol/L的三氯乙烯为低剂量,40μmol/L为高剂量,按以下方式对细胞进行染毒:空白对照、低剂量、高剂量、损伤耐受组(先用低剂量刺激24小时,再用高剂量刺激6小时),然后用荧光差异显示PCR(Fluoro DD-PCR)寻找不同方式刺激差异表达的基因,并对差异表达基因进行克隆、鉴定.结果按方法所示的方式处理细胞,处理完毕后提取各组细胞总RNA,进行荧光差异显示PCR,找到51个差异条带.对其中的11个差异条带进行克隆鉴定同源性比较,发现其中9个已知基因,2个新基因.结论用荧光差异显示PCR方法寻找TCE诱导L-02损伤耐受过程差异表达的基因,通过鉴定基因,为进一步研究TCE诱导L-02的损伤耐受的机理提供科学依据.
作者：卫秦芝；庄志雄；袁建辉；黄海燕；李习艺；杨晓华；庾蕾
来源：卫生研究 2005 年 34卷 4期
