目的 探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制.方法 用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome；采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响；Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化；RT-PCR和Western blotting检测CyclinD1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达；Western blotting检测p-Akt、p-ERK1/2的变化.结果 成功使用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome.exosome可促进肾癌ACHN细胞增殖,抑制其凋亡；在此过程中,CyclinD1 mRNA和蛋白的表达均上调,而caspase-3 mRNA表达无明显变化,caspase-3蛋白表达下调；同时p-Akt和p-ERK 1/2的表达也上调.结论 exosome 可促进肾癌ACHN细胞生长和增殖,抑制细胞凋亡.筛除肾癌微环境中的exosome或抑制其功能,可能成为肾癌治疗的有效新方法.
作者：杨林；吴小候；罗春丽；何云锋；张尧；陈雄；张龙；陈力学
来源：南方医科大学学报 2012 年 32卷 10期
